В настоящее время большую актуальность приобретают исследования, направленные на изучение активных компонентов солодкового корня и продуктов их химических модификаций для создания новых высокоэффективных лекарственных средств [1]. Целенаправленный синтез, физико-химическое и медико-биологическое исследование биокомплексов с эффективными лекарственными препаратами весьма актуальны для решения ряда проблем современной фармации. Учитывая это, нами получено новое смешаннолигандное координационное соединение цинка с глицирризиновой кислотой и гистидином, обладающего гепатопротекторным свойством и условно названное Глигисцин [2].
Согласно требованиям к стандартизации лекарственных препаратов введение в нормативную документацию показателя «посторонние примеси» является обязательным. Наиболее возможное присутствие в качестве примесей остатков продуктов синтеза. Ими могут быть гистидин и глицирризиновая кислота.
Целью данного исследования является определение гистидина в качестве посторонней примеси в препарате Глигисцин методом тонкослойной хроматографии.
Материалы и методы исследования: В качестве материалов исследования использовали хроматографические пластинки, камеру, опрыскиватель, градуированные микрокаппиляры, а также растворители и реагенты фирмы «Мерк» (Германия).
Для определения свободного гистидина были приготовлены 1% раствор препарата и 0,005% стандартного образца гистидина следующим образом: 0,1 г препарата взбалтывали с 10 мл воды в течение 1 мин, центрифугировали при 5000 оборотов в минуту в течение 5 минут и отделяли прозрачный раствор (испытуемый раствор). 0,01г стандартного образца гистидина растворяли в 10 мл воды. 2,5 мл полученного раствора разбавляли водой до 50 мл (стандартный раствор). На линию старта хроматографической пластинки силикагель GF 254 наносили по 5 мкл испытуемого и стандартного растворов. Пластинку высушивали на воздухе и ставили в предварительно насыщенную хроматографическую камеру со смесью растворителей кислота уксусная ледяная - вода - бутанол в соотношении 20:20:60. Когда фронт растворителей проходил 15 см высоты, пластинку вынимали из камеры и высушивали на воздухе. Далее опрыскивали раствором нингидрина и нагревали в сушильном шкафу при 1000 -1050С в течение 15 минут.
Результаты: На основании экспериментальных данных пяти серий препарата установлено, что любое пятно, полученное на хроматограмме испытуемого раствора препарата, не должно быть интенсивнее пятна полученного на хроматограмме стандартного раствора гистидина.
Выводы:Разработан метод тонкослойной хроматографии и установлена предельная норма содержания посторонней примеси гистидина в препарате Глигисцин (не более 0,5%). Данный метод заложен в проект нормативной документации.
Список литературы
- 1. Ирисметов М.П., Джиембаев Б.Ж., Арыстанова Т.А., Барамысова Г.Т. Химия и применение природной глицирризиновой кислоты и её производных// Алматы -2002.,-С. 7.
- 2. Ташпулатова А.Д., Юнусходжаев А.Н., Акбаров А.Б. Комплексное соединение цинка с глицирризиновой кислотой и гистидином // Фармацевтический журнал.-2004.,- №2.- С. 38-40.