В статье приведены результаты исследований по установлению условий хранения и сроков годности сухого экстракта комбинированного состава, обладающего противовоспалительным действием. Исследования проводили долгосрочным методом определения стабильности с применением трех видов тароупаковочных материалов. После закладки образцов на хранение через временные промежутки равные 3-м месяцам проводили определение показателей качества. Полученные результаты свидетельствуют о том, что анализируемый сухой экстракт сохраняет постоянство качественных и количественных показателей в течение 2-х лет во всех видах использованных тароупаковочных материалов.
Ключевые слова: сухой экстракт, стабильность, оценка качества, долгосрочные испытания, тароупаковочный материал.
Одними из наиболее распространенных патологий в стоматологической практике являются воспалительные заболевания слизистой ротовой полости. Согласно данным, опубликованным Всемирной организацией здравоохранения, эти заболевания различной степени тяжести встречаются в 2-45% наблюдений, а у лиц в возрасте от 35 до 44 лет данный показатель составляет 69-98% [1,2].
В последние десятилетия наблюдается увеличение ассортимента лекарственных препаратов на основе лекарственных растений. Причиной этого является сравнительная безопасность средств на основе растительного сырья по сравнению с синтетическими, их меньшая токсичность, обширный спектр терапевтической активности и др. [3,4]. К настоящему времени число наиболее известных немецких, французских, итальянских и швейцарских производителей, ориентированных на выпуск препаратов растительной природы, превысило тысячу [3,5]. Учитывая богатую флору Республики Узбекистан, а также ограниченный ассортимент препаратов для применения в стоматологической практике, сотрудниками Ташкентского фармацевтического института методом фармакологического скрининга подобран состав композиции из лекарственного растительного сырья, обладающего максимальным противовоспалительным действием. На основе данной композиции получен комплексный сухой экстракт.
Цель исследования: научно-обоснованное установление сроков годности и условий хранения сухого экстракта комбинированного состава, обладающего противовоспалительным действием.
Таблица 1 - Результаты определения качественных и количественных показателей образцов сухого экстракта
|
№ |
Определяемый показатель |
Нормативы по НД |
Полученные результаты |
|
1 |
Внешний вид |
аморфный гигроскопичный порошок коричневого цвета с зеленоватым оттенком со специфическим запахом и своеобразным пряным вкусом |
соответствует |
|
2 |
Подлинность |
Дубильные вещества. К 10 мл спиртового раствора экстракта добавляют несколько капель раствора железоаммониевых квасцов, должно появиться специфическое черно-зеленое окрашивание. |
соответствует |
|
Рутин. К 1-2 мл водного раствора экстракта прибавляют несколько капель раствора хлорного железа, должно появиться зеленое окрашивание |
соответствует |
||
|
3 |
Потеря в массе при высушивании |
Не более 5% |
3,93% |
|
4 |
Тяжелые металлы |
Окраска, появившаяся в испытуемом растворе, не должна превышать окраску эталонного раствора. |
соответствует |
|
5 |
Микробиологическая чистота |
В 1 г сухого экстракта допускается наличие общего числа аэробных микроорганизмов – не более 104 КОЕ, дрожжевых и плесневых грибов – не более 102 КОЕ, энтеробактерий, устойчивых к желчи, не более 102 КОЕ, при отсутствии Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Escherichia coli . В 25 г сухого экстракта должны отсутствовать бактерии рода Salmonella |
соответствует |
|
6 |
Количественное содержание дубильных веществ |
Не менее 14% |
16,03% |
|
7 |
Количественное содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин |
Не менее 2,5% |
3,37% |
Материалы и методы: В качестве объекта исследования был выбран сухой экстракт комбинированного состава, полученный из композиции следующих видов растительного сырья - cortex Quercus, flores Chamomillae, herba Bidentis. Изучение показателей качества анализируемого сухого экстракта проводили в соответствии с требованиями фармакопейных статей: «Экстракты» (ГФ ХI, вып.2.; ГФ ХIII, ОФС.1.4.1.21), «Extracts» (European Pharmacopoeia, 9th edition) и др. [6-8].
Таблица 2 - Результаты изучения стабильности сухого экстракта, упакованного в банки по TSh 6415390981-03:2014 из полиэтилена по ГОСТ 16338-85 с навинчивающимися крышками
|
Наименование показателей |
Нормативы по НТД |
Результаты по месяцам |
|||||||
|
Через 3 месяца |
Через 6 месяцев |
Через 9 месяцев |
Через 12 месяцев |
Через 15 месяцев |
Через 18 месяцев |
через 21 месяц |
через 24 месяца |
||
|
Внешний вид |
аморфный гигроскопичный порошок коричневого цвета с зеленоватым оттен-ком со специфическим запахом и своеобразным пряным вкусом |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
|
Подлинность |
Дубильные вещества. К 10 мл спиртового раствора экстракта добавляют не-сколько капель раствора железоаммониевых квас-цов, должно появиться специфическое черно-зеленое окрашивание. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
|
Рутин. К 1-2 мл водного раствора экстракта прибав-ляют несколько капель раствора хлорного железа, должно появиться зеленое окрашивание |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
|
|
Потеря в массе при высушивани и |
Не более 5% |
4,05% |
4,11% |
4,07% |
4,22% |
4,28% |
4,31% |
||
|
Тяжелые металлы |
Окраска, появившаяся в испытуемом растворе, не должна превышать окраску эталонного раствора |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
соотв. |
|
Микробиоло гическая чистота |
В 1 г сухого экстракта допускается наличие общего числа аэробных микроорганизмов– неболее 104 КОЕ, дрожжевых и плесневых грибов-не более 102 КОЕ,энтеробактерий, устойчивых к желчи, не более 102 КОЕ, при отсутствииPseudomonasaeruginos a, Staphylococcus aureus, Escherichia col . В 25 г сухого экстракта должны отсутствовать бактерии рода Salmonella |
||||||||
|
Количественное содержа-ние |
Дубильных веществ: не менее 14% |
16,15% |
15,90% |
15,96% |
15,71% |
15,38% |
15,27% |
||
|
Суммы флавоноидов в пересчете на рутин: не менее 2,5% |
3,32% |
3,22% |
3,17% |
3,25% |
3,11% |
3,07% |
2,90% |
2,88% |
|
Исследования проводили долгосрочными методами. Было проведено определение таких показателей как внешний вид, подлинность, потеря в массе при высушивании, тяжелые металлы, микробиологическая чистота, количественное определение биоло-гически активных веществ (дубильных веществ и суммы флавоноидов в пересчете на рутин).
Определение вышеприведенных показателей проводили следующими методами:
внешний вид – органолептически;
подлинность – при помощи качественных реакций на дубильные вещества и рутин;
потеря в массе при высушивании - согласно ОФС.1.2.1.0010.15, метод I;
тяжелые металлы - согласно ОФС.1.2.2.2.0012.15, метод 1;
микробиологическая чистота - согласно ОФС.1.2.4.0002.15 «Микробиологическая чистота» (ГФ ХIII издания) категория 3.2;
количественное содержание дубильных веществ - перманганатометрическое титрование согласно ОФС.1.5.3.0008.15, метод 1;
количественное содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин – спектрофотометрически при длине волны 415±2 нм.
Образцы сухого экстракта были упакованы в три вида тароупаковочных материалов:
банки по TSh 64-15390981-03:2014 из полиэтилена по ГОСТ 16338-85 с навинчивающимися крышками;
банки из бесцветной стекломассы тип по ТУ 13-7308001-477-85;
банки из солнцезащитной стекломассы тип БДС-25 по ТУ 64-228-84.
Анализ показателей качества геля проводили через каждые 3 месяца.
Результаты и обсуждение. В таблице 1 приведены результаты соответствия качественных и количественных показателей образцов сухого экстракта перед закладкой на хранение.
Согласно полученным данным, образцы анализируемого сухого экстракта по показателям качества соответствуют требованиям, приведенным в нормативной документации.
Результаты исследований по определению стабильности данного экстракта, упакованного в банки по TSh 64-15390981-03:2014 из полиэтилена по ГОСТ16338-85 с навинчивающимися крышками приведены в таблице 2.
Полученные результаты свидетельствуют о том, что все анализируемые показатели, несмотря на незначительные изменения, соответствовали требованиям НД. Так, внешний вид сухого экстракта остался неизменным за весь период проведения эксперимента. Однако, наблюдалось незначительное повышение содержания влаги и летучих веществ от 3,93% до 4,31%, что характерно практически для всех сухих экстрактов. При этом содержание влаги к концу 2-го года проведения эксперимента не превысило регламентируемые 5%. Качественные реакции на доказание наличия дубильных веществ и рутина также были положительными в течение 2-х лет. Окраска испытуемого раствора сухого экстракта, приготовленная для определения тяжелых металлов не превысила окраску эталонного раствора. Анализ микробиологической чистоты показал, что анализируемый сухой экстракт по истечении 2-х лет по данному показателю соответствует требованиям ГФ ХIII, том 1, ОФС.1.2.4.0002.15 «Микробиологическая чистота» (категория 3.2).
Фармакотерапевтический эффект субстанции независимо от получаемого сырья определяется количественным содержанием действующих веществ. В связи с этим, одним из основных показателей качества сухого экстракта явилось соответствие количественного содержания биологически активных веществ установленным нормам. Согласно данным, приведенным в таблице 1, содержание дубильных веществ должно быть не менее 14%. За период проведение исследований данный показатель снизился от 16,15% до 15,20%, но не опустился ниже регламентируемого значения. Также регулярно анализировалось содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин, которое должно быть не менее 2,5%. К концу 2-го года исследований это значение уменьшилось до 2,88%, т.е. соответствовало предъявляемым требованиям.
Практически аналогичные результаты анализа были получены для образцов сухого экстракта, упакованных в другие тароупаковочные материалы: банки из бесцветной стекломассы тип по ТУ 137308001-477-85 и банки из солнцезащитной стекломассы тип БДС-25 по ТУ 64-228-84, т.е. можно утверждать, что все три вида упаковки обеспечивают постоянство качественных и количественных показателей анализируемого экстракта.
Выводы. По результатам проведенных исследований по изучению стабильности сухого экстракта комплексного состава противовоспалительного действия установлен срок годности равный 2 годам. Исследования продолжаются.
Литература
- Пашкова Г.С., Галиева Д.Т., Исаджанян К.Е., Никитин В.В., Попова В.М., Жиленков Е.Л. Особенности микрофлоры полости рта у пациентов с воспалительными заболеваниями пародонта //Лечение и профилактика. – 2013. - №4 (8).- С.71-76.
- Веденкина Ю.И. Разработка и стандартизация комплексного средства растительного происхождения, рекомендуемого при заболеваниях пародонта: автореферат дисс к.ф.н. – М., 2009. - 15 с.
- Ефимова Т.Я. Фитотерапия: история и современность //Здоровье.-2008.-№12.-С. 8-11.
- Никонов Г.К., Мануйлов Б.М. Основы современной фитотерапии.-Изд-во: Медицина, 2005.-520 с.
- Cheung S.A. Theory of Price Control //Journal of Law and Economics.-2004.-Vol.17.-P.53-71.
- Государственная фармакопея Российской Федерации, XIII изд., Москва (2015); [Электронный ресурс], URL: http://femb.ru/feml.
- Государственная фармакопея СССР, XI изд., вып.2. Москва, 1989.-397 с.
- European Pharmacopoeia, 9th edition, EDQM, Strasbourg (2017); [Электронный ресурс], URL: http://online.edqm.eu/EN/entry.htm.