В данной научной статье докладывается проведение фитохимического анализа состава густого экстракта из плодов можжевельника обыкновенного (Juniperus communis). Методом тонкослойной хроматографии изучен химический состав густого экстракта.Проведены качественные реакции на различные группы биологически активных веществ (БАВ). Полученные результаты свидетельствуют о наличии терпеноидов, Дитерпеноидов, тритерпена, фенольных соединений, кумаринов, флавоноидов, жиров и жирных кислот, липофильных веществв СО2 экстракте (Juniperus communis). При этом в составе густого экстракта можно выделить 4 характерные группы терпенов: бициклические монотерпены, моноциклические монетерпены, моноциклические монотерпеновые спирты и бициклические сесквитерпены. Доминирующей группой являются бициклические монотерпены: α- и β- пинены и камфен. [3].
Введение. Одним из растений, которое уже на протяжении долгого времени не попадает во внимание казахстанских исследователей, является можжевельник обыкновенный – Juniperus communis. По результатам изучения базы лекарственного растительного сырья можно свидетельствовать об отсутствии ЛРС из можжевельника обыкновенного (Juniperus communis) позиционируется как эфиромасличное растение, однако в суммарном фармакологическом эффекте растения участвует полифенольный комплекс, который изучен недостаточно полно. Можжевельник обыкновенный(от лат. Juniperuscommunis)- это вечнозеленое растение из семейства кипарисовых. Он также известен под названием верес, а его древовидные формы называют арча.В лечебных целях чаще всего применяют плоды можжевельника. Ягоды обладают мочегонным, желчегонным, бактерицидным, отхаркивающим, болеутоляющим, успокаивающим, противовоспалительным, кровоочистительным действием [1-2].
Учитывая все вышеперечисленные качества из плодов можжевельника обыкновенного (Juniperus communis) был получен густой экстракт методом экстракции сжиженным диоксидом углерода (СО2-газом) при высоком давлении и низкой температуре. Концентрированный, 100% СО2- экстракт можжевельника обыкновенного (Juniperus communis)представляет собой маслянистую жидкость коричневатого цвета с очень выраженным хвойным, сладковатым ароматом и горьким вкусом.
Был выбран этот метод экстрагирования так как, имеет ряд преимуществ:
- полно и ярко передают в конечный продукт вкус и запах исходного сырья;
- не нуждается в удалении растворителя из экстракта;
Таблица 1 - Методы и результаты качественных реакций
- стерильны и содержат массу природных консервантов и антиоксидантов, помогающих сохранить стабильность микрокомпонентов состава в течение сроков хранения;
- не содержит микробиальных клеток - ни живых, ни мёртвых и продуктов жизнедеятельности микрофлоры;
- прост в использовании и технологичен[6].
Цель работы. Изучение химического состава СО2 экстракта из плодов можжевельника обыкновенного (Juniperus communis) для продолжения дальнейших исследований растений рода Juniperus как источника билогически активных соединений в направлении создания новых лекарственных форм.
Материалы и методы исследования. Для проведения фитохимических исследований на различные группы биологически активных веществ (БАВ) были приготовлены растворы: 1) 96%-ныйспиртовый раствор СО2 экстрактаможжевельника обыкновенного, 2) н-гексановый раствор СО2 экстракта можжевельника обыкновенного, 3) этилацетатный раствор СО2 экстракта можжевельника обыкновенного, 4) водный раствор СО2 экстракта можжевельника обыкновенного (в соотношении 1:10).С целью исследования химического состава СО2 экстракта из плодов можжевельника обыкновенного
(Juniperuscommunis)были проведены следующие качественные реакции: цианидиновая реакция (проба Шинода), взаимодействие со щелочами, реакция с солями железа, реакция с хлоридом алюминия, реакция с 10% раствором ацетата свинца(Pb(CH3COO)2), реакция с 3% раствором хлорида железа FeCl3, реакция на присутствие кумаринов,реакция на присутствие парафинов и других липофильных веществ(липиды, смолы)(Таблица 1).
На основании полученных результатов проведенных исследований в выше-указанной таблице, было доказано присутствие флавоноидов, кумаринов, фенольных соединений, дубильных веществ, парафинов и липофильных веществ в СО2 экстракте из плодов можжевельника обыкновенного (Juniperus communis).
Проводили сравнительные исследования состава извлечений методом ТСХ. Для определения терпеноидов использовали восходящий метод на пластинах «Silufol UV – 254» c алюминиевой подложкой в системегексан – этилацетат (9:1)с использованием в качестве проявителя раствора п-диметиламинобензальдегида в 70% серной кислоте.На линию старта, проведенную на расстоянии 1,5 см от нижнего края хроматографической пластинки размером 10Х10 см, капилляром были нанесены по 5 мкл 96%-ного спиртового раствора , н-гексанового раствора, этилацетатного раствора СО2 экстракта можжевельника обыкновенного, а также растворы свидетели: спиртовый раствор пихтового масла, стандартный образец урсоловой и олеаноловой кислоты.Наблюдаются пятна различной окраски (розовые, красно-фиолетовые, сине-фиолетовые, коричневые, желтые) характерные для терпеноидных соединений [4-5]. Результаты представлены в таблице 2.
Методы |
Реактивы |
Ожидаемые результаты |
Полученные результаты |
Заключение о наличии классификации БАВ |
Цианидиновая реакция (проба Шинода) |
Порошок Mg, HClконц |
розовое, красное или оранжевое окрашивание |
бледно-розовое и оранжевое окрашивание |
флавонолы, флавононы, флавоны |
Реакция взаимодействия со щелочами |
10% NaOH |
желтое окрашивание |
желтое окрашивание |
флавонолы, флавононы, флавоны |
реакция с солями железа |
FeCla |
зеленое окрашивание и осадок |
реакция отрицательная |
- |
реакция с хлоридом алюминия |
AlCls |
желтое окрашивание |
желтое окрашивание |
флавоноиды |
реакция с 10% раствором ацетата свинца |
(Pb(CH3COO)2) |
желтое окрашивание с белым осадком |
желтое окрашивание с белым осадком |
фенольные соединения, флавоноиды |
реакция с 3% раствором хлорида железа (III) |
3% FeCl3 |
розовое или фиолетовое окрашивание |
розовая окраска с фиолетовым оттенком |
флавоноиды, дубильные вещества |
реакция на присутствие кумаринов |
КОН, C6H7NO3S |
оранжевое окрашивание |
оранжевое окрашивание |
кумарины |
реакция на присутствие парафинов и других липофильных веществ (липиды, смолы) |
Дистиллированная вода |
нерастворимый маслянистый остаток |
нерастворимый маслянистый остаток |
парафины, липофильные вещества (липиды, смолы) |
Таблица 2 - Сравнительный анализ извлечений из CO2экстракта можжевельника.
№ |
Спирт этиловый 95% |
Н-гексан |
Этилацетат |
Пихтовое масло |
Урсоловая кислота |
Олеаноловая кислота |
||||||
Rf |
Окраска пятна |
Rf |
Окраска пятна |
Rf |
Окраска пятна |
Rf |
Окраска пятна |
Rf |
Окраска пятна |
Rf |
Окраска пятна |
|
1 |
0,06 |
Коричневая |
0,06 |
Коричневая |
0,06 |
коричневая |
0,06 |
коричнева я |
0,06 |
_ |
0,06 |
Фиолетовая |
2 |
0,15 |
фиолетовая |
0,15 |
фиолетовая |
0,15 |
фиолетовая |
0,15 |
_ |
0,15 |
Фиолетова я |
0,15 |
_ |
3 |
0,3 |
Розовая |
0,3 |
Розовая |
0,3 |
Розовая |
0,3 |
0,3 |
0,3 |
|||
4 |
0,45 |
коричневая |
0,45 |
коричневая |
0,45 |
коричневая |
0,45 |
коричнева я |
0,45 |
_ |
0,45 |
_ |
5 |
0,51 |
розовая |
0,51 |
Розовая |
0,51 |
розовая |
0,51 |
0,51 |
0,51 |
|||
6 |
0,6 |
Фиолетовая |
0,6 |
Фиолетовая |
0,6 |
фиолетовая |
0,6 |
фиолетова я |
0,6 |
_ |
0,6 |
_ |
7 |
0,78 |
фиолетовая |
0,78 |
Фиолетовая |
0,78 |
фиолетовая |
0,78 |
0,78 |
0,78 |
Заключение. По данной работе проведен фитохимическийанализ состава СО2 экстракта из плодов можжевельника обыкновенного (Juniperus communis). Методом тонкослойной хроматографии изучен химический состав СО2 экстракта и проведены качественные реакции на различные группы биологически активных веществ (БАВ). Результаты исследований свидетельствуют о наличии терпеноидов, дитерпеноидов, тритерпена, фенольных соединений, кумаринов, флавоноидов, жиров и жирных кислот, липофильных веществ в СО2 экстракте (Juniperus communis). Полученные результаты могут быть использованы для объективной оценки норм качества фармакопейного лекарственного растительного сырья - экстракта из плодов можжевельника.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Новиков О.О., Писарев Д.И., Жилякова Е.Т., Трифонов Б.В. Можжевельник: фитохимия и фармакология рода. - М.: Изд-во РАМН, 2014. - 178 с.
- Горяев М.И., Игнатова JI.A. Химия можжевельников. - Алма-Ата: Наука, 1969. - 205 с.
- Л.Т. Пашинина, С.А. Абилькаева Биологически активные вещества можжевельника // Вопр. современной фармации. - Алма-Ата: 1985. - С. 105-109.
- Государственная фармакопея СССР: Вып. 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырьё. МЗ СССР. 11-е изд., доп. М.: Медицина. 1991. - 397 с.
- Государственная Фармакопея Республики Казахстан. 2 т. - Алматы: издательский дом «Жiбeк жoлы», 2009. - 792 с.
- Кирий, К.А., Кизим, И.Е., Стасьева, О.Н. Мониторинг показателей качества С02-экстрактов Текст // В сб. трудов КНИИХП «Новые технологии - будущее пищевой промышленности». - Краснодар: КНИИХП, 2002. - С. 178-179.