Хламидии являются грамотрицательными облигатными внутриклеточными паразитами, размножающимися в клетках гладкой мускулатуры, эпителиальных и эндотелиальных клетках, моноцитах и макрофагах. Для человека патогенны 3 вида хламидий: C. Pneumoniae, С prittaci, C. Trachomatis]. Ежегодно в мире по поводу хламидиоза первично обращаются к врачу 80-90 млн. человек. Отмечается сочетание этой инфекции с другими инфекциями, передаваемыми половыми путем. Распространенность хламидиоза на 15% выше, чем гонореи, и продолжает неуклонно расти. Хламидийная инфекция гениталий существенно нарушает репродуктивную функцию и повышает опасность инфицирования ее потомства. Все это определяет необходимость выявления и лечения данной патологии. Хламидиоз цервикального канала в период беременности приводит к внутриутробному инфицированию плода, преждевременным родам, несвоевременному разрыву плодных оболочек, что способствует увеличению заболеваемости и смертности новорожденных.
Хламидиями инфицировано от 500 млн до 1млрд людей. Частота инфицирования гинекологических больных составляет 4-30 %, при наличии аднексита она равняется 20-30%, кольпита и эндоцервицита - до 10%[4]. Основу патогенеза хламидиоза составляет медленно протекающий рубцовый процесс: нарушения в капиллярном звене микроциркуляторного русла, потеря клетками ворсинок, нарушение трансэндотелиального обмена, стаз и краевое стояние тромбоцитов, гипоксия ткани, отек, нарушение цитопемсиса, вплоть до полного отсутствия пиноцитозных пузырьков. Механизм рубцевания заключается в усилении синтеза коллагенообразования и пролиферация фибробластов, что является причиной трубного бесплодия, эктопической беременности[5]. Лабораторная диагностика играет огромную роль в выявлении хламидиоза. При этом надо знать, что ни один из методов лабораторной диагностики не является совершенным. У каждого метода есть свои преимущества и недостатки. Поэтому не каждый положительный результат однозначно свидетельствует о заболевании. И наоборот не каждый отрицательный результата исключает заболевание. В этой статье мы постарались изложить общие представления о лабораторной диагностике хламидиоза. Общий мазок является самым простым и наиболее доступным методом. У женщин исследуют материал из двух мест: мочеиспускательных# канал и шейка матки, методом соскоба. Суть метода сводится к тому, что исследуемый материал тонким слоем наносят на покровное стекло: высушивают и окрашивают специальными красками: затем смотрят в световом микроскопе. С помощью традиционного окрашивания хламидии обнаруживаются менее чем в четверти случаев. Этот метод хорошо работает только при остром хламидиозе, а при хроническом он безэффективен.
Методы выявления антигенов возбудителя включают ИФА (иммуноферментный анализ) и ПИФ (прямая иммунофлюоресценция), в том числе и эксперсс-диагностика с помощью набора «Хламисет». Иммуноферментный анализ позволяет оценить наличие хламидий в пробах даже невооруженным глазом (чем сильнее желтая окраска раствора, тем больше хламидий обнаружено). Но точный результат получают при оценке окраски на специальном приборе. Чувствительность метода при хламидиозе чуть ниже, чем у иммунофлюоресцентных методов, но специфичность выше (до 100%). Метод прямой иммунофлюоресценции позволяет увидеть хламидии внутри клеток в виде светящихся включений. Метод хорошо зарекомендовал себя и при остром, и при хроническом хламидиозе. Его назначают при бесплодии с неясной причиной, беременности с осложнениями, неясном воспалении мочеполовой сферы. И чувствительность, и специфичность метода оценивается приблизительно в 90 %. Результат считается положительным, только если обнаруживаются внутри клеток. Для диагностики хламидиоза применяются зарубежные и российские перпараты (хламоскрин).
Метод требует квалифицированной лабораторной подготовки и не всегда срабатывает при малом количестве возбудителей хламидиоза. Расширить спектр получаемой информации можно выявлением антител к хламидиям в крови пациента. Так можно оценить стадию хламидиоза (острая или хроническая, состояние после рецидива или выздоровления - здесь большую роль играет нахождение иммуноглобулинов класса М, указывающих на остроту процесса), определить, помогает ли лечение (вместе с посевом и методом ПЦР), а также выявить хламидиоз вне гениталий (поражение глаз, суставов, легких). Так, после выздоровления сохраняются в основном иммуноглобулины класса G при рецидиве А и М, при хроническом хламидиозе - А и G, при остром - иммуноглобулины всех классов.
Очень труден, хотя и обладает высокой ценностью, культуральный метод специальная экспериментальная культура клеток заражается пробой от больного. В случае положительного результата через несколько дней количество хламидий в культуре резко возрастает. Метод позволяетвыявить разновидности хламидий, устойчивых к лечению, а также обнаружить хламидиоз при ВИЧ инфекции.
Методы выявления ДНК возбудителя (так называемая ДНК-диагностика) включают ПЦР (полимеразная цепная реакция). Материалом для исследования могут служить не только выделения из мочеиспускательного канала, шейки матки, влагалища, но и моча. Эти методы являются очень современными и характеризуются высокой точностью. Время от взятия материала для исследования до получения результатов обычно составляет 1-2 сут. Чувствительность ПЦР равна 10 копиям на миллилитр, а специфичность практически 100 %.
ПЦР хорошо себя зарекомендовала в диагностике хронических и бессимптомных инфекций. При обильных (особенно гнойных) выделениях точность метода существенно снижается. При гнойных выделениях более предпочтительный ИФА, ПИФ и посев. Роль лечащего врача в диагностике хламидиоза. Качество диагностики хламидиоза во многом зависит от лечащего врача. Он должен быть профессионалом в области инфекций, передающихся половым путем. Даже на этапе диагностики перед ним стоят серьезные задачи: индивидуально выбрать объем обследования; из множества существующих методов исследования выбрать оптимальный; в зависимости от конкретной ситуации выбрать место взятия материала (мочеиспускательный канал, шейка матки, влагалище, глотка, прямая кишка, коньюктива); не ошибиться со временем взятия материала (исследование в инкубационном периоде, а также в течении 3-4 недели после приема антибиотиков, может оказаться недостоверным); правильно взять материал для исследования.
Выводы. Если сравнивать методы диагностики хламидиоза по объективности, то учет результатов прост и фактический не зависит от человеческого фактора (т.е. субъективного мнения исследователя) при иммуноферментном анализе и ПЦР-диагностике хламидиоза. Иммунофлюоресцентный и культуральный методы очень утомительный для лаборанта, а оценка результатов во многом зависит от опыта и субъективной оценки специалиста. Культурный метод, связанный с выращиванием клеток, требует нескольких суток, в то время как остальные методы диагностики хламидиоза в течение 1-5 часов. Врачу отводится главная роль в выявлении этого заболевания, так как от его знаний лучших методов диагностики хламидиоза, будет зависеть качество жизни его пациентов.
ЛИТЕРАТУРА
- Фримель X., Брок И. Основы иммунологии: Пер. с нем. - М: Мир, 1986.-254с.
- Clamp J.R. The relationship beetween the immune system and mucus in the protection of mucous membranes // Biochem. Soc. Trans. - 1984. - V. 12. -N5.-P. 754-756.
- Dura W.T., Bernatowska E. Secretory component, 1-antitrypsin and lysozime in Ig A deficient children. An immunohistochemical evaluation of intestinal mucosa // Histopatology. - 1984. - V.8. - N 5. - P. 747 - 754.
- Man A.L., Prieto-Garcia M.E., Nicoletti C. Improving M cell mediated transport across mucosal barriers: do certain bacteria hold the keys? Immunology, 2004, 113: 15-22.
- Снайдере А., ДЖ.М.Николаидес. Ультразвуковые маркеры хромосомных дефектов плода М: Видар 1997, 1 46-4.
- Врожденные пороки развития пренатальная диагностика и тактика. Под редакцией Петриковского Б.М., Медведева М.В., Юдиной Е.В., М: реальное время 1999, с 95-97.
- Пренатальная диагностика врожденных порогов развития в ранние сроки беременности. Под редакцией Медведева М.В., М: реальное время, 2000, с 19-21.
- Станик И. Эмбриология человека. Братислава: Веда, 1997, с 227-228.