Другие статьи

Цель нашей работы - изучение аминокислотного и минерального состава травы чертополоха поникшего
2010

Слово «этика» произошло от греческого «ethos», что в переводе означает обычай, нрав. Нравы и обычаи наших предков и составляли их нравственность, общепринятые нормы поведения.
2010

Артериальная гипертензия (АГ) является важнейшей медико-социальной проблемой. У 30% взрослого населения развитых стран мира определяется повышенный уровень артериального давления (АД) и у 12-15 % - наблюдается стойкая артериальная гипертензия
2010

Целью нашего исследования явилось определение эффективности применения препарата «Гинолакт» для лечения ВД у беременных.
2010

Целью нашего исследования явилось изучение эффективности и безопасности препарата лазолван 30мг у амбулаторных больных с ХОБЛ.
2010

Деформирующий остеоартроз (ДОА) в настоящее время является наиболее распространенным дегенеративно-дистрофическим заболеванием суставов, которым страдают не менее 20% населения земного шара.
2010

Целью работы явилась оценка анальгетической эффективности препарата Кетанов (кеторолак трометамин), у хирургических больных в послеоперационном периоде и возможности уменьшения использования наркотических анальгетиков.
2010

Для более объективного подтверждения мембранно-стабилизирующего влияния карбамезапина и ламиктала нами оценивались перекисная и механическая стойкости эритроцитов у больных эпилепсией
2010

Нами было проведено клинико-нейропсихологическое обследование 250 больных с ХИСФ (работающих в фосфорном производстве Каратау-Жамбылской биогеохимической провинции)
2010


C использованием разработанных алгоритмов и моделей был произведен анализ ситуации в системе здравоохранения биогеохимической провинции. Рассчитаны интегрированные показатели здоровья
2010

Специфические особенности Каратау-Жамбылской биогеохимической провинции связаны с производством фосфорных минеральных удобрений.
2010

Интегральная оценка иммунитета и подходы к дифференцированной иммунокоррекции при невынашивании беременности

АННОТАЦИЯ

Изучен субпопуляционный состав лимфоцитов и активационных маркеров эндометрия. Материалом для иммунологического исследования служили биоптаты маточного эндометрия в секреторной фазе, полученные при гистероскопии. Установлено, что у женщин с невынашиванием беременности в анамнезе на локальном уровне в эндометрии достоверно (P<0,05) сниженным оказалось содержание СÐ56+лимфоцитов. При этом выравниваются маркеры активации HLA-DR+ и CD95+. Уровни экспрессии достоверно выше, чем в контрольной группе и CD25+, а также выше сравнительно с показателями в 1-й группе. В качестве критерия для выбора вида иммунотерапии используют индекс CD95+∕CD16+, при значениях которого менее 0,8 на фоне снижения CD3+, CD4+ назначают индукторы интерферона, при 0,9-1,29 - препараты интерферона, более 1,3 - препараты интерлейкина-2.

Привычное невынашивание беременности, определяемое как две и более клинически обнаруженные потери беременности, случившихся до 20-й недельгестации, имеет место у 2-4 % супружеских пар [1]. Важная роль в патогенезе прерывания беременности отводится иммунным механизмам. Считается, что высокая цитотоксическая активность натуральных киллеров (NK) в области фетоплацентар- ного комплекса приводит к гибели цитотрофобласта. При спонтанных выкидышах происходит дефицит локальной децидуальной супрессорной активности, опосредуемой естественными супрессорными клетками, продуцирующими трансформирующий фактор роста- b2(TΦP-b2) [2]. В периферической крови содержание CD16+CD56+ повышено, а в эндометрии увеличен процент CD16+ и уменьшен процент CD56+, продуцирующих TΦP-b2 [3]. В то же время в исследовании QuenbyS. (1999) было показано, что у пациенток, страдающих привычным невынашиванием беременности, уровни CD4+, CD14+, CD16+, CD56+ и HLA-DR+- клеток в эндометрии были значительно выше, чем в контроле [4].

Персистенция в эндометрии бактериальных и вирусных инфекций является пусковым механизмом для разнонаправленных иммунопатологических реакций и служит основой для формирования различных нарушений репродуктивной функции, в том числе привычного невынашивания беременности. Поэтому комплексная оценка системного и локального иммунитета требует дальнейших исследований в плане понимания механизмов отторжения плода и выработки стратегии лечения.

Цель исследования - изучение субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови и эндометрия у пациенток с привычным невынашиванием беременности в анамнезе.

Материал и методы. Обследованы 75 пациенток с привычным невынашиванием беременности в анамнезе в возрасте 28,3+5,0 лет. В зависимости от уровня нарушения репродуктивной функции все женщины были разделены на 3 группы:

  • 1 группа (98 чел.) - с ненарушенной репродуктивной функцией,
  • 2 группа (42 чел.) - с невынашиванием беременности в анамнезе,
  • 3 группа (24 чел.) - с бесплодием.

Контрольную группу составили 30 практически здоровых женщин.

У всех женщин, страдающих воспалительными заболеваниями гениталий, имелась та или иная персистирующая инфекция. Диагноз бруцеллеза основывался на клинико-эпидемиологических данных и подтверждался обнаружением специфических антител в реакциях Райта и Хаддлсона и/или с помощью внутрикожной аллергической пробы Бюрне, а также выявлением антиген-специфических лимфоцитов (АСЛ) бруцеллезной специфичности. Диагноз HBV- и HCV-инфеĸций верифицировался обнаружением в иммуноферментном анализе (ИФА) маркеров: HBsAg, antiHBcor-IgM или -IgG, HBeAg, antiHCV-total, antiHCV-cor, antiHCV - NS-2-3-4-5 и в полимеразной цепной реакции (ПЦР) - DNA и/или RNA. Диагноз урогенитального хламидиоза подтверждался обнаружением специфических антител к Ch. trachomatis в ИФА и антигенов хламидий в реакции непрямой иммунофлюоресценции (РНИФ).

Субпопуляционный анализ лимфоцитов периферической крови методом проточной цитометрии по методике, модифицированной НИИ иммунологии М3 РФ [4] на приборе «FacsCalibur» (BectonDickenson/США) с помощью моноклональных антител к поверхностным антигенам лимфоцитов (НПО «Сорбент»/ Москва, РФ): зрелые Т-лимфоциты - CD3+, Т-хелперы - CD4+, цитотоксические лимфоциты CD8+, натуральные киллеры CD16+, CD56+, В-лимфоциты CD20+, молекулы адгезии CDllb+, маркеры ранней CD25+ и поздней активации CD95+, HLA-DR+.

У 20 женщин с невынашиванием беременности в анамнезе изучали субпопуляционный состав лимфоцитов и активационных маркеров эндометрия. Материалом для иммунологического исследования служили био- птаты маточного эндометрия в секреторной фазе, полученные при гистероскопии. В качестве контроля использовали показатели субпопуляций лимфоцитов эндометрия, полученного при удалении внутриматочного контрацептива у женщин с ненарушенной репродуктивной функцией. Выделение иммунокомпетентных клеток из ткани эндометрия проводили безферментативным способом. Фрагменты эндометрия помещали в контейнер «Medicon» (BectonDickenson/США), добавляли фосфатный буфер и измельчали в гомогенизаторе «Medimachine» (BectonDickenson/ США) в течение нескольких минут. Полученную клеточную суспензию центрифугировали 30 мин в градиенте плотности фиколл-верогра- фин (d=l,078). Определяли содержание зрелых лимфоцитов CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD56+, маркеры ранней CD25+ и поздней активации CD95+.

Результаты исследования и обсуждение. Данные, характеризующие особенности популяционного состава лимфоцитов периферической крови при различных состояниях репродуктивной функции женщин, представлены в табл. 1.

Во второй группе больных (с невынашиванием беременности в анамнезе) по средним значениям показателей субпопуляций лимфоцитов достоверных отличий в сравнении с контрольной группой не выявлено. Но индивидуальные значения содержания субпопуляций лимфоцитов колебались в широких пределах. На фоне тенденции к снижению содержания зрелых лимфоцитов и Т-хелперов у 42,8 % пациенток регистрировалось резкое снижение содержания СÐЗ+-клеток и у 28,6 % - снижение СÐ4+-ĸлетоĸ.

Разнонаправленность изменений наблюдалась также с показателями цитотоксических клеток, у 1/4 содержание СÐ8+-лимфоцитов было сниженным и у 11,9% - повышенным. Содержание лимфоцитов имело тенденцию к повышению. Наблюдалась выраженная разбалансировка показателей содержания натуральных киллеров. У 30,9 % пациенток уровень CD16+ был повышен, а у 14,2 % - резко сни

жен. При этом у 20 % пациенток содержание другой популяции натуральных киллеров CD56+ было повышено более чем в 2 раза и у 21 % - резко снижено. Следует отметить, что повышенное содержание СÐİб+лимфоцитов сопровождалось сниженным содержанием CD3+, СÐ4+ĸлетоĸ при нормальном уровне СÐ8+лимфоцитов.

При анализе активационных маркеров установлено достоверное (P<0,05) повышение относительного и абсолютного содержания СÐ25+лимфоцитов по сравнению с аналогичным показателем контрольной группы. Отмечалась тенденция к повышению раннего HLA- DR+ и позднего активационного маркера CD95+. При этом адекватное повышение их экспрессии наблюдалось только у 42,8 и 48,5 % женщин соответственно. Содержание лимфоцитов, экспрессирующих рецепторы адгезии (CDllb+), не отличалось от контроля, хотя и имело тенденцию к повышению.

В то же время регистрировалось снижение лимфоцитов экспрессирующих рецептор к Fc-IgG (CD56+), т. е. способных к антителозависимой клеточной цитотоксичности (АЗКЦ).

В большинстве случаев прерывание беременности опосредуют неантиген-специфичес- кие естественные киллеры и макрофаги. Coulam С.В. и соавт. [5] показали, что у женщин с привычным выкидышем выше содержание в крови CD56+CD16+, продуцирующих эмбриотоксические цитокины. Однако локальная продукция натуральных киллеров отличается от содержания в периферической крови. В эндометрии у пациенток с привычным выкидышем увеличивается содержание только классических СÐİб+клеток, а содержание СÐ56+ĸлетоĸ, продуцирующих трансформирующий фактор роста b2, уменьшается. Считается, что уменьшение содержания клеток данного фенотипа у женщин с привычными выкидышами может быть связано с изменением профиля экспрессии цитокинов и связанной с этой невозможностью снабжения зародыша соответствующей средой, содержащей факторы роста [6]. Функциональное состояние натуральных киллеров, т. е. экспрессия ими активационных маркеров, остается неизученным.

В связи с этим нами был изучен популяционный состав эндометрия женщин с невынашиванием беременности в анамнезе.Данные, характеризующие особенности популяционного состава лимфоцитов эндометрия женщин с невынашиванием беременности в анамнезе, представлены в табл. 2. Установлено, что в группе женщин с невынашиванием беременности в анамнезе на локальном уровне в эндометрии достоверно (P<0,05) сниженным оказалось содержание СÐ56+лимфоцитов, что согласуется с данными литературы.

Относительное содержание другой популяции естественных киллеров CD16+ достоверно не отличалось от контроля, хотя имело тенденцию к снижению. Следует отметить тенденцию к снижению содержания CD3+, CD4+ клеток по сравнению с аналогичными показателями контрольной группы. Содержание цитотоксических СÐ8+ĸлетоĸ имело тенденцию к повышению, а в индивидуальных показателях был выраженный разброс, у 1/3 пациенток их содержание было в пределах контрольных значений и 1/3 - резко повышенным.

Анализ уровня экспрессии активационных маркеров (табл. 3) показал, что относительное содержание СÐ25+лимфоцитов было достовер-

но (P<0,05) сниженным по сравнению с аналогичным показателем контрольной группы.

Следует отметить, что снижение ранней активации наблюдалось преимущественно в популяции СÐ56+лимфоцитов, что проявлялось достоверным (P<0,05) снижением пула СÐ56+СÐ25+ĸлетоĸ. Изучение экспрессии рецепторов к ИЛ-2 (CD25) у отдельных субпопуляций лимфоцитов выявило тенденцию к снижению у CD4+, СÐ8+лимфоцитов, к повышению - у СÐİб+клеток.

В то же время выявлено достоверное (P<0,05) повышение клеток, готовых к апоптозу (CD95+). При этом повышенная экспрессия рецептора CD95+ была обнаружена у CD4+, СÐ8+ĸлетоĸ и натуральных киллеров, как CD16+, так и СÐ56+ĸлетоĸ.

У здоровых фертильных женщин тканевую интегрально сть эндометрия и защита от патогенных микроорганизмов обеспечиваются в основном популяцией активированных Т-кле- ток, продуцирующих ИНФ-g. При этом естественные киллеры с фенотипом CD56+CD16- обладают слабой ЕК-подобной цитотоксической активностью.

Полученные результаты свидетельствуют, что на локальном уровне в эндометрии у женщин с привычным невынашиванием беременности постоянная стимуляция патогенными микроорганизмами приводит к снижению содержания СÐ56+лимфоцитов, снижению экспрессии ранних активационных маркеров и повышенной готовности клеток к апоптозу. При этом наблюдаются разнонаправленные изменения в содержании цитотоксических СÐ8+лимфоцитов.

Таким образом, при привычном невынашивании беременности инфекционного генеза наблюдается картина разнонаправленных изменений субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови. Это указывает на различные иммунологические механизмы формирования невынашивания беременности: повышение активности цитотоксических лимфоцитов CD8+ и недостаточная или чрезмерная активность естественных киллеров. На локальном уровне в эндометрии у женщин с невынашиванием беременности в анамнезе постоянная стимуляция патогенными микроорганизмами приводит к снижению содержания СÐ56+лимфоцитов, снижению экспрессии ранних активационных маркеров и повышенной готовности клеток к апоптозу.

При осложненном урогенитальном хламидиозе носят дискретный характер: повышение уровня CD16+ лимфоцитов ассоциируется с достоверно более высоким относительным и абсолютным количеством СÐ25+ĸлетоĸ и нормальным содержанием CD3+, CD4+ и CD8+, повышенным уровня В-лимфоцитов. При нор- мальном/сниженном содержании CDl 6+ наблюдается снижение CD3+ и СÐ4+лимфоцитов. Исходное абсолютное содержание СÐİб+клеток может служить критерием выбора метода иммунокоррекции: при высоком (>400xl06/л) - целесообразно применение ИИБЖ, при низком (400x106/л) - предпочтительны препараты рекомбинантных цитокинов - a-2b-ΠHΦ или ИЛ-2.

Разработка интегрального показателя, включающего уровень CD16+ и CD95+, создает предпосылки для подбора наиболее эффективных методов иммунокорригирующей терапии для каждого отдельного пациента [И.В.Волчек и соавт., 2002]. В связи с этим нами был предложен индекс CD95+/ CDl6+, позволяющий повысить эффективность лечения посредством дифференцированного назначения иммуномодулятора, воздействующего на конкретный уровень иммунной системы.По мере прогрессирования инфекции снижаются уровни иммуно- регуляторных субпопуляций лимфоцитов CD3+, CD4+. Уровень СÐİб+лимфоцитов меняется от повышенного, отражающего активацию иммунной системы, до сниженного с увеличением доли апоптирующих лимфоцитов (CD95+), отражающего её истощение. Применение индекса CD95+∕CD16+ позволяет учесть степень нарушения иммунной системы. Так, низкое его значение (менее 0,8) соответствует повышенному уровню CDl6+ лимфоцитов и низкому содержанию апоптирующих клеток. В этом случае целесообразно применение индукторов интерферона. Индекс 0,9-1,29 соответствует нормальному содержанию CD16+ лимфоцитов и повышенному уровню апоптоза, что свидетельствует об истощении иммунокомпетентных клеток. И в этих условиях назначение препаратов интерферона преследует 2 задачи: во-первых, заместительная терапия в условиях дефицита эндогенного интерферона; во-вторых, экзогенные интерферон усиливают синтез и секрецию эндогенных интерферонов всех классов, функциональную активность иммунокомпетентных клеток - Т-лимфоцитов, NK-ĸлетоĸ и мо- ноцитов/макрофагов. При значении индексаболее 1,3, имеющего место при рецидивирующих инфекциях, в иммунной системе превалируют процессы апоптоза. В этих условиях для полноценной работы иммунной системы необходимо увеличить содержание иммунокомпетентных клеток не только качественно, но и количественно. Поэтому целесообразно назначение препаратов интерлейкина-2, который воздействует как на структурную (клеточную), так и на функциональную (регуляторную) составляющие иммунной системы. ИЛ-2 способствует дифференцировке NK-ĸлетоĸ в лимфокин-акти- вированные киллерные клетки (ЛАК-клетки), отличающиеся высокой цитологической активностью и широким спектром действия.

Выводы

В качестве критерия для выбора вида иммунотерапии используют индекс CD95+/ CD16+, при значениях которого менее 0,8 на фоне снижения CD3+, CD4+ - назначают индукторы интерферона. При значении индекса, равном 0,9-1,29 назначают препараты интерферона, при значении индекса более 1,3- препараты интерлейкина-2.

 

ЛИТЕРАТУРА

  1. Clark G.F.. Oehninger S., Patankar M.S. et al. A role for glycoconjugates in human development: the human feto-embrionicdefence hypothesis // Hum. Reprod. - 1996. - Vol. 11. N 33. - P. 467-473.
  2. Clark D. A., Lea R.G., Podor T. et al. Cytokines determining the success or failure of pregnancy// Ann. N.Y. Acad. Sei. - 1991. - Vol. 656. - P. 524-536.
  3. Coulam C.B., Clark D.A., Beer A.E. et al. Current clinical options for diagnosis and treatment of recurrent spontaneous abortion. Clinical Guidelines Recommendation committee for diagnosis and treatment of recurrent spontaneous abortion // AJRI. - 1997. - 38 (2). - P. 57-74.
  4. Quenby S., Bates M., Doig T. et al. Pre-Implantation endometrial leukocytes in women with recurrent miscarriage // Hum. Reprod. Vol. 14. - № 9. - P. 2386-2391.
  5. Yamamoto T, Tekahashi Y, Kase N., Mori H. Decidual NK cells in patients with recurrent abortion // AJRI. - 1998. - 40. - P. 274.

Разделы знаний

Архитектура

Научные статьи по Архитектуре

Биология

Научные статьи по биологии 

Военное дело

Научные статьи по военному делу

Востоковедение

Научные статьи по востоковедению

География

Научные статьи по географии

Журналистика

Научные статьи по журналистике

Инженерное дело

Научные статьи по инженерному делу

Информатика

Научные статьи по информатике

История

Научные статьи по истории, историографии, источниковедению, международным отношениям и пр.

Культурология

Научные статьи по культурологии

Литература

Литература. Литературоведение. Анализ произведений русской, казахской и зарубежной литературы. В данном разделе вы можете найти анализ рассказов Мухтара Ауэзова, описание творческой деятельности Уильяма Шекспира, анализ взглядов исследователей детского фольклора.  

Математика

Научные статьи о математике

Медицина

Научные статьи о медицине Казахстана

Международные отношения

Научные статьи посвященные международным отношениям

Педагогика

Научные статьи по педагогике, воспитанию, образованию

Политика

Научные статьи посвященные политике

Политология

Научные статьи по дисциплине Политология опубликованные в Казахстанских научных журналах

Психология

В разделе "Психология" вы найдете публикации, статьи и доклады по научной и практической психологии, опубликованные в научных журналах и сборниках статей Казахстана. В своих работах авторы делают обзоры теорий различных психологических направлений и школ, описывают результаты исследований, приводят примеры методик и техник диагностики, а также дают свои рекомендации в различных вопросах психологии человека. Этот раздел подойдет для тех, кто интересуется последними исследованиями в области научной психологии. Здесь вы найдете материалы по психологии личности, психологии разивития, социальной и возрастной психологии и другим отраслям психологии.  

Религиоведение

Научные статьи по дисциплине Религиоведение опубликованные в Казахстанских научных журналах

Сельское хозяйство

Научные статьи по дисциплине Сельское хозяйство опубликованные в Казахстанских научных журналах

Социология

Научные статьи по дисциплине Социология опубликованные в Казахстанских научных журналах

Технические науки

Научные статьи по техническим наукам опубликованные в Казахстанских научных журналах

Физика

Научные статьи по дисциплине Физика опубликованные в Казахстанских научных журналах

Физическая культура

Научные статьи по дисциплине Физическая культура опубликованные в Казахстанских научных журналах

Филология

Научные статьи по дисциплине Филология опубликованные в Казахстанских научных журналах

Философия

Научные статьи по дисциплине Философия опубликованные в Казахстанских научных журналах

Химия

Научные статьи по дисциплине Химия опубликованные в Казахстанских научных журналах

Экология

Данный раздел посвящен экологии человека. Здесь вы найдете статьи и доклады об экологических проблемах в Казахстане, охране природы и защите окружающей среды, опубликованные в научных журналах и сборниках статей Казахстана. Авторы рассматривают такие вопросы экологии, как последствия испытаний на Чернобыльском и Семипалатинском полигонах, "зеленая экономика", экологическая безопасность продуктов питания, питьевая вода и природные ресурсы Казахстана. Раздел будет полезен тем, кто интересуется современным состоянием экологии Казахстана, а также последними разработками ученых в данном направлении науки.  

Экономика

Научные статьи по экономике, менеджменту, маркетингу, бухгалтерскому учету, аудиту, оценке недвижимости и пр.

Этнология

Научные статьи по Этнологии опубликованные в Казахстане

Юриспруденция

Раздел посвящен государству и праву, юридической науке, современным проблемам международного права, обзору действующих законов Республики Казахстан Здесь опубликованы статьи из научных журналов и сборников по следующим темам: международное право, государственное право, уголовное право, гражданское право, а также основные тенденции развития национальной правовой системы.